NTRC是一家總部位于荷蘭Oss的私人生物技術(shù)公司，由MSD / Organon的前雇員成立。NTRC將有關(guān)疾病治療的新穎生物學(xué)概念轉(zhuǎn)化為小分子候選藥物。NTRC擁有強(qiáng)大的學(xué)術(shù)網(wǎng)絡(luò)，可利用它來(lái)確定小分子藥物發(fā)現(xiàn)的新方法和創(chuàng)新方法。NTRC開(kāi)發(fā)了許多突破性的技術(shù)平臺(tái)。這些平臺(tái)可作為NTRC Precision Medicine Services供客戶使用。

NTRC精氨酸金分析

Arginase Gold™檢測(cè)技術(shù)基于使用專有探針Arginase Gold™檢測(cè)Arginase-1活性。探針在精氨酸存在下發(fā)出熒光信號(hào)，在鳥(niǎo)氨酸存在下淬滅（圖1）。Arginase Gold™是一種均勻的混合測(cè)量（“僅添加”）測(cè)定。通過(guò)在室溫下的單個(gè)溫育步驟檢測(cè)精氨酸。該測(cè)定法利用了熒光讀數(shù)，并且功能強(qiáng)大（Z'因子> 0.6）?？梢詫?shí)時(shí)跟蹤測(cè)定的進(jìn)展，從而進(jìn)行動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)。Arginase Gold™是專門為用于多孔板和高通量篩選而開(kāi)發(fā)的。

圖1.精氨酸金™分析的示意圖。使L-精氨酸向L-鳥(niǎo)氨酸的酶促轉(zhuǎn)化進(jìn)行60分鐘，此后可以立即用510nm的熒光檢測(cè)來(lái)測(cè)量反應(yīng)的進(jìn)程。

精氨酸酶1

精氨酸酶-1是將L-精氨酸轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-鳥(niǎo)氨酸的酶。精氨酸酶-1是癌癥免疫療法的重要藥物靶標(biāo)。從大腸桿菌重組表達(dá)并純化全長(zhǎng)精氨酸酶-1。純化的精氨酸酶-1將L-精氨酸催化轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-鳥(niǎo)氨酸。

•在高達(dá)2.5 mM的濃度范圍內(nèi)，Arginase Gold™的信號(hào)與L-精氨酸和L-鳥(niǎo)氨酸的比例成線性比例（圖2）。
•Arginase Gold™非常適合化合物庫(kù)的高通量篩選。

圖2.測(cè)定中L-精氨酸和L-鳥(niǎo)氨酸濃度的Arginase Gold™校準(zhǔn)曲線。B.測(cè)定法產(chǎn)生的精氨酸酶-1參考抑制劑ABH的劑量反應(yīng)曲線。

好處

•酶活性以均一的測(cè)定形式測(cè)量。讀出前僅需要兩個(gè)附加步驟。
•在室溫下溫育時(shí)間短，反應(yīng)條件溫和，可在384孔板的高通量機(jī)器人系統(tǒng)上操作。
•適用于高通量篩選的穩(wěn)健分析。
•精氨酸酶1的抑制導(dǎo)致信號(hào)的獲得。
•可以使用同一套件進(jìn)行動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)和終點(diǎn)測(cè)量。
•與標(biāo)準(zhǔn)比色尿素測(cè)定法相比，熒光讀數(shù)不易受到干擾。
•該測(cè)定可在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行，從反應(yīng)開(kāi)始到熒光檢測(cè)僅需1.5個(gè)小時(shí)。

可直接從NTRC訂購(gòu)1,000個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的Arginase Gold™試劑盒，以備使用。產(chǎn)品編號(hào)為NTRC-hARG-1K。該試劑盒包括Arginase-1酶，底物，檢測(cè)試劑和參考抑制劑。請(qǐng)與我們聯(lián)系以獲取基于定制的大量產(chǎn)品或單獨(dú)訂購(gòu)組件。